一、适用范围
　　适用于实验室从事ELISA实验的实验技术人员和研究生。
　　二、操作规程
　　1、标准品的配制：使用前在标准品中加入适量的去离子水，配成10ng/ml的母液，设标准品八管，第一管加入标本稀释液900ul，第二管至第八管加入标本稀释液500ul，在第一管中加入10ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对比稀释，从第七管中吸出500ul,弃出，第八管为空白对照。
　　2、检测程序：
　　1）加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应物充分混匀后置37℃120分钟。
　　2）洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。
　　3）每孔中加入第一抗工作液100ul，将反应板充分混匀后置37℃60分钟。
　　4）洗板，同前。
　　5）每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。
　　6）洗板，同前。
　　7）每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。
　　8）每孔加入100ul终止液混匀。
　　9）30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。
　　3、结构计算与判断：
　　1）所有OD值都应扣除空白后在进行计算。
　　2）以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。
　　3）根据样品OD值在该曲线上查出相应的样品含量。
　　4、注意事项：
　　1) 以上标准孔及样品空均建议做复孔，每次测定时均应做标准曲线。
　　2) 洗涤过程很关键，洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误升高。
　　3) 板条开封后剩余板条要密封好，保持剩余板条的干燥。
　　4) 本试剂盒应在4℃保存，仅用于科研，不用于临床。
　　5) 以上标准曲线的制作和加样流程仅供参考，具体检测时请按试剂盒说明书进行。