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| 发布日期：2014-07-30 09:51 信息来源:未知 作者：admin 访问次数:
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一、适用范围
适用于实验室从事免疫组化实验的实验技术人员和研究生。
二、操作规程
1）石蜡切片，常规脱蜡至水。
2）0.3%或 3%H2O2去离子水（无色液体）孵育 10-30分钟，以灭活内源性过氧化物酶活性。
3）蒸馏水冲洗，PBS 浸泡 5分钟
4）候选步骤：采用抗原修复：微波（建议 30 分钟内4次中火）、高压、酶修复方法。自然冷却，再用 3分钟×3次.
5）血清封闭：室温 15-30分钟，尽可能与二抗来源一致。倾去，勿洗。
6）滴加适当比例稀释的一抗，37℃孵育 2~3小时或 4℃过夜（最好复温）。PBS 冲洗，3分钟×5次。
7）滴加生物素标记的二抗，室温或 37℃孵育 30 min-1h。
8）PBS 冲洗，3分钟×5次。
9）滴加SP（链霉亲和素-过氧化物酶），室温或 37℃孵育 30 分钟-1h。
10）PBS 冲洗，3分钟×5次。
11）显色剂显色（DAB等）。
12）自来水充分冲洗。
13）可进行复染，脱水，透明。
14）选择适当的封片剂封片。
注意事项：本法仅适用于SP法，其它方法请参考相关说明书。
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