一、适用范围
　　适用于实验室从事细胞培养的实验技术人员和研究生。
　　二、操作规程
　　1、所需试剂  细胞培养液、血清、胰酶、PBS或Hank`s液
　　2、规程：
　　2.1 细胞株的培养
　　2.1.1 获取所需细胞株（一般细胞株的运送是把细胞放在培养瓶中，干冰保存运输的）
　　2.1.2 得到所需细胞株后弃掉多余的培养液，放到5%的CO2培养箱中培养
　　2.1.3 每天至少观察一次，待细胞长满整个培养瓶的80%时传代
　　2.1.4 倒掉培养液，用1mlPBS 漂洗细胞一次，加入500ul胰酶消化，消化时间视细胞种类、胰酶浓度和消化温度而定，一般3-5min
　　2.1.5 终止消化，向上一步消化液中加入含10%血清的培养液，一般5ml
　　2.1.6 吹打，用吸管轻轻吹打至细胞全部脱落，注意尽量减少气泡产生
　　2.1.7 细胞计数，取少量液体于细胞计数板上，确定接种密度
　　2.1.8 将细胞接种到另外的培养瓶中
　　2.1.9 换液，根据细胞生长情况，间隔一定时间半量换液。
　　2.2 原代细胞培养
　　2.2.1 原代细胞的获取 无菌条件下取动物组织剪碎
　　2.2.2 向剪碎的动物组织加入适宜浓度的胰酶，消化，时间因细胞种类和胰酶浓度而定
　　2.2.3 终止消化，向上一步消化叶重加入含10%血清的培养液，一般5ml
　　2.2.4 吹打 将终止消化后的组织转入一培养皿中，加入一定量的培养液轻轻吹打数次，静置5-10分钟
　　2.2.5 细胞计数，取少量液体于细胞计数板上，确定接种密度
　　2.2.6 将细胞接种到培养瓶或培养板中，放入5%的CO2培养箱中培养