强直性脊柱炎（AS)是一种慢性、进行性和炎性疾病，主要累及骶骼关节、脊柱、脊柱骨软组织及四肢关节，表现为椎间盘纤维环和纤维环附近结缔组织的骨化，椎间动关节和四肢关节滑膜的炎症和增生，严重者可失去劳动能力，AS是血清阴性脊柱关节病中具有代表性的疾病，临床上曾长期把AS误认为是类风湿关节炎的一个亚型。20世纪60年代以来人们才认识到无论从病因学、遗传学、流行病学、病理和临床表现特点等诸多方面来看，AS都是一种不同于类风湿关节炎的独立疾病。
 　　HLA-B27抗原作为人类MHC系统的一种血清学特异性，于1970年第四届国际组织相容性试验专题讨论会上首次被指定，1975年被世界卫生组织（WHO)正式命名为HLA-B27。因于AS之间的强相关而引人瞩目，AS患者中96%具有HLA-B27而正常人则仅有7%，这在所有已知HLA与疾病的关联中是最强，最典型的，除AS外，HLA-B27尚与Reiter综合征（HLA-B27阳性率70%-90%）、银屑病性关节炎（HLA-B27阳性率50%-60%）急性前葡萄膜炎（HLA-B27阳性率40%-50%）和溃疡性结肠炎伴关节病（HLA-B27阳性率5%-10%）等许多严重危害人类健康的脊椎性关节病相关。
　　与传统检测方法相比，应用流式细胞仪来测定HLA-B27的表达，无需分离淋巴细胞，操作简单，灵敏度可达100%，特异性达97.4%；结果稳定，样本之间、不同仪器之间、不同实验室之间可重复性高。
　　应用FCM检测HLA-B27主要有直接免疫荧光法和间接免疫荧光法。由于单克隆抗体技术的不断进步，目前多采用直接免疫荧光法，其原理主要是利用荧光标记的抗HLA-B27的单克隆抗体和淋巴细胞表面的HLA-B27抗原结合，使细胞具有一定的荧光强度，这种荧光的强度可用流式细胞仪测定。根据流式细胞仪通道值的高低判断HLA-B27抗原的阳性或阴性，其主要方法如下：
　　1.单色荧光染色法  取100ul肝素货EDTA-Na2(或EDTA-K3)抗凝血，加入20ul荧光标记的抗HLA-B27单克隆抗体，混匀后室温、避光孵育20min；加红细胞裂解液室温保持15min以溶解红细胞，然后将溶解红细胞后剩下的白细胞用磷酸盐缓冲液（PBS)洗涤1次，1000g离心5min，去掉上清，2h内用流式细胞仪测定。计数10000个细胞，在前向散射光（FSC)和侧向散射光（SSC)散点图中分析淋巴细胞群表达HLA-B27的情况。
　　2.双色荧光染色法  采用HLA-B27 FITC/HLA-B7 PE双荧光单克隆抗体，标本制备方法同上。流式细胞仪测定时，先在FSC和SSC散点图上圈定淋巴细胞群，然后在FITC荧光通道和PE荧光通道组成的双荧光散点图上分析淋巴细胞表达HLA-B27 FITC和HLA-B7 PE情况，来判定HAL-B27阴性或阳性。
　　3.定量双色荧光法  采用HLA-B27 FITC/CD3 PE双色荧光单克隆抗体，标本制备方法同上。在BD FACS流式细胞仪测定时，首先用荧光微球校准仪器，HLA-B27分析软件自动在SSC/CD3 PE散点图中圈定CD3+细胞（T淋巴细胞），然后在FITC荧光直方图中分析T淋巴细胞上HLA-B27 FITC荧光表达强弱，并结合标准荧光微球设定的阴、阳性界限、确定HLA-B27阴性。